文章标签: 抗体 抗原抗体反应 一抗二抗 科学 科普
抗体有一抗和二抗的区别,抗体也称免疫球蛋白是免疫系统响应“外来"物质(即微生物上存在的抗原)而产生的糖蛋白。每种抗体都是不相同的,它们会与其同源抗原结合并中和感染过程中微生物产生的毒素。抗体存在于血浆、血清、唾液和眼泪等体液中。事实上,它们约占血浆中蛋白质的 20%。
抗体结构
抗体属于 Y 形分子,它的结构主要是由3个部分所组成的。
它们总共有4条链:即两条轻链与两条重链。这些链的特定结构和组合允许抗体分子同时与多个细胞结合。抗体分子的不同部分可以结合多种抗原,也可以结合一些效应分子。
抗体的可变区或V区表示/指Y结构的两个臂,该区域可以与抗原结合。相比之下,Y 结构的茎被称为恒定区或 C 区,它只能与有限数量的效应细胞和分子结合。
一抗和二抗
经常产生抗体用于研究。它们根据其结合能力和用途分为初级和次级。
可以与特定蛋白质或感兴趣的生物分子结合的抗体称为一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等动物为宿主,以单克隆 (mAb) 或多克隆抗体 (pAb) 的形式生产一抗。
MAb 或 pAb 各有优缺点,在选择一抗之前需要考虑这些优缺点。
MAb 由动物的单个 B 细胞克隆产生,因此仅针对抗原的一个表位。
PAb 由动物的多个 B 细胞克隆产生,并且具有针对抗原的几个表位的抗体的异质混合物。
MAb 非常适合相同的生产和标准化实验,并且产生的背景染色最少或不产生背景染色。在使用 mAb 时,与不需要的蛋白质发生交叉反应的可能性也降低了。
由于 pAb 可以结合单一抗原的多个表位,因此它们能够识别抗原中的微小变化。它们还产生更强的抗原检测信号。因 此,它们非常适合涉及变性蛋白质的实验。
一抗和二抗的应用
一抗可用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默病和帕金森病的生物标志物。
二抗则主要用于检测和纯化抗原蛋白。
二抗在标记和检测方面比较灵敏和灵活——所以,它们在流式细胞术、蛋白质印迹和细胞成像等一系列应用中用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。
二抗类型的选择基于一抗的类别:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、标签类型和来源宿主。
由于大多数一抗是使用少数宿主物种开发的,并且大多数一抗属于 IgG 类,因此制造商通常提供可用于许多不同检测程序和系统的即用型二抗。
常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗鸡 IgG 或抗山羊 IgG。所选择的二抗应始终能够识别产生一抗的宿主物种,例如,为了检测从小鼠产生的一抗,使用抗小鼠二抗。
在 ELISA 和蛋白质印迹中,标记通常是化学发光、比色或基于荧光的,但在流式细胞术和免疫荧光中,仅使用荧光标记。