稳定细胞系中的细胞表达滴度
稳定生产细胞系生产过程中，在可重复性和可放大性等多方面都具有许多优势。细胞的培养参数对细胞系的培育也具有较大的影响力。比如：温度、pH、渗透压、气体流速、罐内压力、搅拌罐内的搅拌桨类型、搅拌速度和细胞代谢物水平等。另外，在生物工艺技术中，细胞的密度、细胞活性、线粒体活性、LDH、NADH水平等生物因素，也会影响到蛋白质合成、PTM等从而波及到产物的产量及品质。
所以，优化细胞系的抗体滴度，除了对宿主细胞系进行设计改造外，细胞的培养参数优化设计，对于提升细胞表达滴度、满足产品质量要求也很重要。
我们知道，在抗体产品的产量是通过工艺放大来实现，而生物工艺放大过程中又会受到很多因素的影响。比如生物因素和细胞培养参数等，生物反应器容量体积等。所以在放大工艺生产中的各个环节，都需要严格把控，此外还需要进一步强化技术培训指导，是工艺生产操作规范化、标准化，从而确保细胞的生产力与产品质量的有效提升。
瞬时转染细胞系中的细胞表达滴度
瞬时转染细胞由于此类细胞构建生产细胞系比较耗时，而且难度也较大，故很少用于临床或者商业规模化生产，比较适用于实验室小规模试验。在稳定生产细胞系进行规模化工艺放大生产时，有时也会使用瞬时转染细胞放大到批次或补料分批生物反应器工艺中，以快速提升产品产量加速生产过程。 目前，一些细胞生产厂商也在尝试提高瞬时转染HEK293细胞的表达滴度。比如：这种工艺技术用于蛋白质生产的转染工艺和哺乳动物表达载体进行优化，可使重组抗体的单位体积产量达到>0.5g/L。 国内细胞生产商开发的CHO细胞高滴度瞬转表达系统具有高产量低成本等优势，已成为生产抗体类药物广泛应用的工程细胞，而CHO细胞瞬时转染是新药研发过程中主要的技术工艺。
从长远看来，提高瞬时转染HEK293细胞的抗体滴度 在基因治疗领域也很有意义。瞬时转染是虽是产生高质量载体的常用方法，但规模化放大生产仍然是基因制药行业的一个重大挑战。要想取得重大突破还需要更多的努力。在进行MDCK 细胞 、 HEK293细胞培养, CHO悬浮细胞培养、贴壁细胞培养、微载体培养、微生物培养、高抗体滴度瞬转表达系统生产时也会面临同样的问题。
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