PreCap Desalting 葡聚糖基质凝胶过滤层析介质填料试剂介绍
PreCap Desalting适用于分子量大于5000Da的蛋白或其他大分子样品的脱盐、缓冲液置换或小分子的去除。
PreCap Desalting 葡聚糖基质凝胶过滤层析介质填料试剂装有1 ml或5 ml Smartdex G-25中。Smartdex G-25系列介质是一类以葡聚糖为基质的凝胶过滤层析 （gel filtration chromatography）介质，其工作原理主要是利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。
表 1. PreCap Desalting 产品性能
项目 | 性能 |
介质 | Smartdex G-25 中 |
粒径 | 85-260 pm |
最大上样量 | 10%柱体积 |
脱盐效率 | >95% |
排阻极限 | Mr 5000 |
保存温度 | 2-8 °C |
2. 使用说明
2.1缓冲液的准备
所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22 pm或0.45 pm滤膜过滤。
平衡液为蛋白脱盐后，用于保护蛋白的溶液，根据客户需求自行选择。
2.2样品准备
样品在上样前建议离心或用0.22 pm或0.45|jm滤膜过滤，减少杂质，防止堵塞柱子。
2.3样品脱盐
PreCap Desalting是一种脱盐预装柱产品，可以用各种常规的中低压色谱系统，以AKTA仪器使用为例介绍PreCap Desalting的使用方法。
1） 将系统管道中注满去离子水。去掉预装柱上塞，连接至色谱系统，不要旋紧。再折断预装柱下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。最后旋紧预装柱上端的色谱系统接头。
2） 用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。
3） 使用至少5倍柱床体积的平衡液平衡色谱柱。1 ml预装柱推荐流速0.2 ml/min, 5 ml预装柱推荐流速为1 ml/mino
4） 利用样品环上样。加入10%柱体积的样品，不足时用平衡液将样品稀释至相应体积再上样。
5） 加入平衡液继续冲洗，分管收集流穿液，检测样品回收率和脱盐效率。
3. 清洗及保存
如果柱子的流速变慢或者脱盐效果变差，为除去残留的杂质，如变性蛋白或脂质等，有时需要对脱盐柱进行在位清洗。常用的清洗液为
0.1-0.2 M NaOH或非离子型去垢剂。
1） 使用一倍的柱体积0.1-0.2 M NaOH冲洗介质，流速控制在0.2 ml/min左右。
2） 用足够量的去离子水，冲洗介质，1 ml预装柱推荐流速0.2 ml/min, 5 ml预装柱推荐流速为1 ml/min,直至pH值至中性。
3） 用至少三倍柱体积20%乙醇溶液冲洗介质，然后分别盖上下堵头和上塞，将介质保存于20%乙醇保护液，置于2-8°C保存。 注：不建议介质多次重复再生和使用。
4.PreCap Desalting 葡聚糖基质凝胶过滤层析介质填料试剂 订购信息及相关产品
名称 | 货号 | 规格 |
SpinDesalt Column | SEC02301 | 50次 |
SEC003C1 | 8.3 ml, 1 支 | |
Prepacked Desalting Column | SEC003C2 | 8.3 ml, 5 支 |
SEC003C3 | 8.3 ml, 20 支 | |
SEC018C11 | 1X1 ml | |
SEC018C51 | 5X1 ml | |
PreCap Desalting | SEC018C15 | 1X5 ml |
SEC018C55 | 5X5 ml | |
SEC018CS | 3X1 ml+1X5 ml |
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